人ELISA試劑盒注意事項：
1.實驗前將所有試劑平衡至室溫，包括樣本、TMB（非常重要）。
2.強烈建議老師在操作的時候每個樣本包括標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔（請務(wù)必這樣操作），因為這樣可以：求平均值，確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性對試劑盒的性能進行評估對自己的操作進行評估解決跳孔。
3.為保證老師ELISA實驗結(jié)果準(zhǔn)確，其中幾點重要的操作注意事項請務(wù)必參考：如果以下表述與說明書中不一致，請按照實驗對應(yīng)說明書的要求操作。
1）標(biāo)準(zhǔn)品溶解：標(biāo)準(zhǔn)品溶解嚴(yán)格按照說明書進行操作，建議老師進行標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時，在EP管中進行。
2）孵育：說明書中進行孵育的時候，一定要用微孔板振蕩器振蕩，這個很重要，利于抗原抗體充分結(jié)合。
3）洗板：建議按照說明書操作，每次洗滌至少洗液浸泡30s，重復(fù)6次，洗板時間太短、次數(shù)太少會導(dǎo)致實驗效果不佳，延長洗板時間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。
4）如何控制標(biāo)曲顯色(僅針對雙抗夾心法ELISA試劑盒)5-30分鐘顯色時間為經(jīng)驗范圍，每個具體的實驗，可根據(jù)以下情況，確定大致的顯色時間：
①肉眼觀察：標(biāo)曲S5孔有淡藍色、Blank孔無明顯藍色時，即可終止。
② 儀器判斷：630nm左右波長下，ac標(biāo)曲S1孔的OD值達到0.5-0.7、S5孔的OD值達到0.05-0.08、Blank孔的OD值小于0.05時，即可終止。
③ 高敏系列試劑盒因靈敏度更高，需嚴(yán)格控制顯色時長，可較普通試劑盒適當(dāng)縮短顯色時間。
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